CD3和CD28可作為T細(xì)胞激活的兩個(gè)重要靶點(diǎn)，在體外聯(lián)合使用CD3和CD28抗體刺激T細(xì)胞，可以模擬體內(nèi)T細(xì)胞活化的雙信號(hào)作用。使用 BeaverBeads?小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠可以實(shí)現(xiàn)在體外簡(jiǎn)單便捷的活化及擴(kuò)增小鼠 T 細(xì)胞，無需添加飼養(yǎng)層細(xì)胞（抗原遞呈細(xì)胞）或抗原。BeaverBeads?為直徑5 μm 的惰性超順磁珠，共價(jià)偶聯(lián)抗小鼠CD3和CD28抗體，模擬抗原提呈細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞的激活和擴(kuò)增。T細(xì)胞激活和擴(kuò)增后，可以通過磁力架輕松去除T細(xì)胞激活磁珠。

產(chǎn)品特點(diǎn)

• 磁珠激活后，48小時(shí)檢測(cè)CD25+CD69+ T細(xì)胞占比86.69%；

• 激活后T細(xì)胞可在體外培養(yǎng)至21天，擴(kuò)增倍數(shù)>1000倍；

• 操作簡(jiǎn)便，磁珠清洗后即可加入細(xì)胞，且激活及擴(kuò)增過程中無需移除。

應(yīng)用方向

• 基礎(chǔ)免疫學(xué)研究；

• 細(xì)胞免疫治療：CAR-T細(xì)胞制備、動(dòng)物腫瘤模型研究等；

• 藥物與抗體篩選：免疫調(diào)節(jié)藥物、抗體功能驗(yàn)證。

實(shí)驗(yàn)案例

1.  T細(xì)胞激活信號(hào)高

以分選后的小鼠CD3+ T細(xì)胞為例，使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠或進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠與細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí)、48小時(shí)，通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)刺激前后CD25+ CD69+ T細(xì)胞的比例。激活前CD25+ CD69+ T細(xì)胞占比為0.30%，使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠后CD25+ CD69+ T細(xì)胞占比為59.57%（24小時(shí)）、86.69%（48小時(shí)），高于進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組CD25+ CD69+ T細(xì)胞的占比40.41%（24小時(shí)）、69.61%（48小時(shí)）。

圖1：小鼠CD3+ T細(xì)胞激活前CD25和CD69的表達(dá)，以及使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細(xì)胞CD25和CD69的表達(dá)（24小時(shí)，48小時(shí)），對(duì)比使用進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細(xì)胞CD25和CD69的表達(dá)（24小時(shí)，48小時(shí)）。

2.  T細(xì)胞增殖能力強(qiáng)

小鼠CD3+ T細(xì)胞激活前使用CFSE標(biāo)記，隨著T細(xì)胞的增殖，CFSE信號(hào)會(huì)逐漸減弱。如圖2所示，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠與CD3+ T細(xì)胞共培養(yǎng)2天后，T細(xì)胞CFSE的熒光信號(hào)顯著降低，略優(yōu)于進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠能夠良好的刺激T細(xì)胞在體外增殖。

圖2 .T細(xì)胞激活磁珠與小鼠CD3+ T細(xì)胞在體外培養(yǎng)3天后，T細(xì)胞的增殖能力比較。Control表示刺激前的小鼠CD3+ T細(xì)胞的CFSE信號(hào)。

將BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和小鼠CD3+ T細(xì)胞在體外進(jìn)行共培養(yǎng)，期間每隔2天進(jìn)行分孔換液，檢測(cè)21天后T細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在持續(xù)培養(yǎng)21天過程中，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠可以在體外實(shí)現(xiàn)1000倍的細(xì)胞擴(kuò)增（圖3A），高于進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠的擴(kuò)增倍數(shù)。我們檢測(cè)了擴(kuò)增過程中T細(xì)胞的活率變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠與進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠，在擴(kuò)增過程中T細(xì)胞的活率相近（圖3 B）。

圖3. A：比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細(xì)胞的增殖情況。

B：比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細(xì)胞的活率變化。

3.  T細(xì)胞可響應(yīng)磁珠的二次激活

小鼠CD3+ T細(xì)胞激活后移除磁珠，待細(xì)胞恢復(fù)靜息狀態(tài)后，第二次使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠，刺激小鼠CD3+ T細(xì)胞激活。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，恢復(fù)靜息后的小鼠CD3+ T細(xì)胞可以二次響應(yīng)磁珠信號(hào)并實(shí)現(xiàn)激活標(biāo)志物CD25、CD69的表達(dá)上調(diào)（圖4）且在二次激活過程中T細(xì)胞的響應(yīng)與進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠效果相近。

圖4：比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組，小鼠CD3+ T細(xì)胞靜息后二次刺激的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

產(chǎn)品信息

暫無說明書

暫無視頻