小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠
¥458.00

  • 產(chǎn)品貨號(hào):70912-200
  • 產(chǎn)品單位:
  • 產(chǎn)品說明:200μL

CD3和CD28可作為T細(xì)胞激活的兩個(gè)重要靶點(diǎn),在體外聯(lián)合使用CD3和CD28抗體刺激T細(xì)胞,可以模擬體內(nèi)T細(xì)胞活化的雙信號(hào)作用。使用 BeaverBeads?小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠可以實(shí)現(xiàn)在體外簡(jiǎn)單便捷的活化及擴(kuò)增小鼠 T 細(xì)胞,無需添加飼養(yǎng)層細(xì)胞(抗原遞呈細(xì)胞)或抗原。BeaverBeads?為直徑5 μm 的惰性超順磁珠,共價(jià)偶聯(lián)抗小鼠CD3和CD28抗體,模擬抗原提呈細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞的激活和擴(kuò)增。T細(xì)胞激活和擴(kuò)增后,可以通過磁力架輕松去除T細(xì)胞激活磁珠。


產(chǎn)品特點(diǎn)

  • 磁珠激活后,48小時(shí)檢測(cè)CD25+CD69+ T細(xì)胞占比86.69%;

  • 激活后T細(xì)胞可在體外培養(yǎng)至21天,擴(kuò)增倍數(shù)>1000倍;

  • 操作簡(jiǎn)便,磁珠清洗后即可加入細(xì)胞,且激活及擴(kuò)增過程中無需移除。


應(yīng)用方向

  • 基礎(chǔ)免疫學(xué)研究;

  • 細(xì)胞免疫治療:CAR-T細(xì)胞制備、動(dòng)物腫瘤模型研究等;

  • 藥物與抗體篩選:免疫調(diào)節(jié)藥物、抗體功能驗(yàn)證。

 

 

實(shí)驗(yàn)案例

1.  T細(xì)胞激活信號(hào)高

以分選后的小鼠CD3+ T細(xì)胞為例,使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠或進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠與細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí)、48小時(shí),通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)刺激前后CD25+ CD69+ T細(xì)胞的比例。激活前CD25+ CD69+ T細(xì)胞占比為0.30%,使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠后CD25+ CD69+ T細(xì)胞占比為59.57%(24小時(shí))、86.69%(48小時(shí)),高于進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組CD25+ CD69+ T細(xì)胞的占比40.41%(24小時(shí))、69.61%(48小時(shí))。

圖1:小鼠CD3+ T細(xì)胞激活前CD25和CD69的表達(dá),以及使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細(xì)胞CD25和CD69的表達(dá)(24小時(shí),48小時(shí)),對(duì)比使用進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細(xì)胞CD25和CD69的表達(dá)(24小時(shí),48小時(shí))。

 

 

2.  T細(xì)胞增殖能力強(qiáng)

小鼠CD3+ T細(xì)胞激活前使用CFSE標(biāo)記,隨著T細(xì)胞的增殖,CFSE信號(hào)會(huì)逐漸減弱。如圖2所示,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠與CD3+ T細(xì)胞共培養(yǎng)2天后,T細(xì)胞CFSE的熒光信號(hào)顯著降低,略優(yōu)于進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠能夠良好的刺激T細(xì)胞在體外增殖。

圖2 .T細(xì)胞激活磁珠與小鼠CD3+ T細(xì)胞在體外培養(yǎng)3天后,T細(xì)胞的增殖能力比較。Control表示刺激前的小鼠CD3+ T細(xì)胞的CFSE信號(hào)。

 

將BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和小鼠CD3+ T細(xì)胞在體外進(jìn)行共培養(yǎng),期間每隔2天進(jìn)行分孔換液,檢測(cè)21天后T細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在持續(xù)培養(yǎng)21天過程中,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠可以在體外實(shí)現(xiàn)1000倍的細(xì)胞擴(kuò)增(圖3A),高于進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠的擴(kuò)增倍數(shù)。我們檢測(cè)了擴(kuò)增過程中T細(xì)胞的活率變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn),BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠與進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠,在擴(kuò)增過程中T細(xì)胞的活率相近(圖3 B)。

 

圖3. A:比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細(xì)胞的增殖情況。

B:比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細(xì)胞的活率變化。

 

3.  T細(xì)胞可響應(yīng)磁珠的二次激活

小鼠CD3+ T細(xì)胞激活后移除磁珠,待細(xì)胞恢復(fù)靜息狀態(tài)后,第二次使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠,刺激小鼠CD3+ T細(xì)胞激活。結(jié)果發(fā)現(xiàn),恢復(fù)靜息后的小鼠CD3+ T細(xì)胞可以二次響應(yīng)磁珠信號(hào)并實(shí)現(xiàn)激活標(biāo)志物CD25、CD69的表達(dá)上調(diào)(圖4)且在二次激活過程中T細(xì)胞的響應(yīng)與進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠效果相近。

 

圖4:比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細(xì)胞激活磁珠和進(jìn)口T細(xì)胞激活磁珠組,小鼠CD3+ T細(xì)胞靜息后二次刺激的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

 


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