小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠
¥1998.00

  • 產品貨號:70912-1000
  • 產品單位:
  • 產品說明:1000μL

CD3和CD28可作為T細胞激活的兩個重要靶點,在體外聯合使用CD3和CD28抗體刺激T細胞,可以模擬體內T細胞活化的雙信號作用。使用 BeaverBeads?小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠可以實現在體外簡單便捷的活化及擴增小鼠 T 細胞,無需添加飼養(yǎng)層細胞(抗原遞呈細胞)或抗原。BeaverBeads?為直徑5 μm 的惰性超順磁珠,共價偶聯抗小鼠CD3和CD28抗體,模擬抗原提呈細胞對T細胞的激活和擴增。T細胞激活和擴增后,可以通過磁力架輕松去除T細胞激活磁珠。


產品特點

  • 磁珠激活后,48小時檢測CD25+CD69+ T細胞占比86.69%;

  • 激活后T細胞可在體外培養(yǎng)至21天,擴增倍數>1000倍;

  • 操作簡便,磁珠清洗后即可加入細胞,且激活及擴增過程中無需移除。


應用方向

  • 基礎免疫學研究;

  • 細胞免疫治療:CAR-T細胞制備、動物腫瘤模型研究等;

  • 藥物與抗體篩選:免疫調節(jié)藥物、抗體功能驗證。

 

 

實驗案例

1.  T細胞激活信號高

以分選后的小鼠CD3+ T細胞為例,使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠或進口T細胞激活磁珠與細胞共培養(yǎng)24小時、48小時,通過流式細胞儀檢測刺激前后CD25+ CD69+ T細胞的比例。激活前CD25+ CD69+ T細胞占比為0.30%,使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠后CD25+ CD69+ T細胞占比為59.57%(24小時)、86.69%(48小時),高于進口T細胞激活磁珠組CD25+ CD69+ T細胞的占比40.41%(24小時)、69.61%(48小時)。

圖1:小鼠CD3+ T細胞激活前CD25和CD69的表達,以及使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細胞CD25和CD69的表達(24小時,48小時),對比使用進口T細胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細胞CD25和CD69的表達(24小時,48小時)。

 

 

2.  T細胞增殖能力強

小鼠CD3+ T細胞激活前使用CFSE標記,隨著T細胞的增殖,CFSE信號會逐漸減弱。如圖2所示,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠與CD3+ T細胞共培養(yǎng)2天后,T細胞CFSE的熒光信號顯著降低,略優(yōu)于進口T細胞激活磁珠效果。實驗結果表明,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠能夠良好的刺激T細胞在體外增殖。

圖2 .T細胞激活磁珠與小鼠CD3+ T細胞在體外培養(yǎng)3天后,T細胞的增殖能力比較。Control表示刺激前的小鼠CD3+ T細胞的CFSE信號。

 

將BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和小鼠CD3+ T細胞在體外進行共培養(yǎng),期間每隔2天進行分孔換液,檢測21天后T細胞的擴增倍數。實驗結果顯示,在持續(xù)培養(yǎng)21天過程中,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠可以在體外實現1000倍的細胞擴增(圖3A),高于進口T細胞激活磁珠的擴增倍數。我們檢測了擴增過程中T細胞的活率變化,結果發(fā)現,BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠與進口T細胞激活磁珠,在擴增過程中T細胞的活率相近(圖3 B)。

 

圖3. A:比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和進口T細胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細胞的增殖情況。

B:比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和進口T細胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細胞的活率變化。

 

3.  T細胞可響應磁珠的二次激活

小鼠CD3+ T細胞激活后移除磁珠,待細胞恢復靜息狀態(tài)后,第二次使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠,刺激小鼠CD3+ T細胞激活。結果發(fā)現,恢復靜息后的小鼠CD3+ T細胞可以二次響應磁珠信號并實現激活標志物CD25、CD69的表達上調(圖4)且在二次激活過程中T細胞的響應與進口T細胞激活磁珠效果相近。

 

圖4:比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和進口T細胞激活磁珠組,小鼠CD3+ T細胞靜息后二次刺激的檢測數據。

 


產品信息