CD3和CD28可作為T細胞激活的兩個重要靶點，在體外聯合使用CD3和CD28抗體刺激T細胞，可以模擬體內T細胞活化的雙信號作用。使用 BeaverBeads?小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠可以實現在體外簡單便捷的活化及擴增小鼠 T 細胞，無需添加飼養(yǎng)層細胞（抗原遞呈細胞）或抗原。BeaverBeads?為直徑5 μm 的惰性超順磁珠，共價偶聯抗小鼠CD3和CD28抗體，模擬抗原提呈細胞對T細胞的激活和擴增。T細胞激活和擴增后，可以通過磁力架輕松去除T細胞激活磁珠。

產品特點

• 磁珠激活后，48小時檢測CD25+CD69+ T細胞占比86.69%；

• 激活后T細胞可在體外培養(yǎng)至21天，擴增倍數>1000倍；

• 操作簡便，磁珠清洗后即可加入細胞，且激活及擴增過程中無需移除。

應用方向

• 基礎免疫學研究；

• 細胞免疫治療：CAR-T細胞制備、動物腫瘤模型研究等；

• 藥物與抗體篩選：免疫調節(jié)藥物、抗體功能驗證。

實驗案例

1.  T細胞激活信號高

以分選后的小鼠CD3+ T細胞為例，使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠或進口T細胞激活磁珠與細胞共培養(yǎng)24小時、48小時，通過流式細胞儀檢測刺激前后CD25+ CD69+ T細胞的比例。激活前CD25+ CD69+ T細胞占比為0.30%，使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠后CD25+ CD69+ T細胞占比為59.57%（24小時）、86.69%（48小時），高于進口T細胞激活磁珠組CD25+ CD69+ T細胞的占比40.41%（24小時）、69.61%（48小時）。

圖1：小鼠CD3+ T細胞激活前CD25和CD69的表達，以及使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細胞CD25和CD69的表達（24小時，48小時），對比使用進口T細胞激活磁珠后小鼠CD3+ T細胞CD25和CD69的表達（24小時，48小時）。

2.  T細胞增殖能力強

小鼠CD3+ T細胞激活前使用CFSE標記，隨著T細胞的增殖，CFSE信號會逐漸減弱。如圖2所示，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠與CD3+ T細胞共培養(yǎng)2天后，T細胞CFSE的熒光信號顯著降低，略優(yōu)于進口T細胞激活磁珠效果。實驗結果表明，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠能夠良好的刺激T細胞在體外增殖。

圖2 .T細胞激活磁珠與小鼠CD3+ T細胞在體外培養(yǎng)3天后，T細胞的增殖能力比較。Control表示刺激前的小鼠CD3+ T細胞的CFSE信號。

將BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和小鼠CD3+ T細胞在體外進行共培養(yǎng)，期間每隔2天進行分孔換液，檢測21天后T細胞的擴增倍數。實驗結果顯示，在持續(xù)培養(yǎng)21天過程中，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠可以在體外實現1000倍的細胞擴增（圖3A），高于進口T細胞激活磁珠的擴增倍數。我們檢測了擴增過程中T細胞的活率變化，結果發(fā)現，BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠與進口T細胞激活磁珠，在擴增過程中T細胞的活率相近（圖3 B）。

圖3. A：比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和進口T細胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細胞的增殖情況。

B：比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和進口T細胞激活磁珠組小鼠CD3+ T細胞的活率變化。

3.  T細胞可響應磁珠的二次激活

小鼠CD3+ T細胞激活后移除磁珠，待細胞恢復靜息狀態(tài)后，第二次使用BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠，刺激小鼠CD3+ T細胞激活。結果發(fā)現，恢復靜息后的小鼠CD3+ T細胞可以二次響應磁珠信號并實現激活標志物CD25、CD69的表達上調（圖4）且在二次激活過程中T細胞的響應與進口T細胞激活磁珠效果相近。

圖4：比較BeaverBeads? 小鼠CD3/CD28 T細胞激活磁珠和進口T細胞激活磁珠組，小鼠CD3+ T細胞靜息后二次刺激的檢測數據。

產品信息

暫無說明書

暫無視頻